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使用中應注意周圍環境對液相色譜儀結果的影響
點擊次數:1319 發布時間:2020-12-10
使用中應注意周圍環境對液相色譜儀結果的影響
液相色譜儀的原理是利用不同待分離物質在兩相中的親和力差異,如分配系數、吸附容量等。利用外力,含有樣品的流動相(氣體、液體)通過固定在柱或平板上的固定相表面,該固定相與流動不相溶。當流動相中攜帶的混合物流經固定相時,混合物中的組分與固定相相互作用。
液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。與試樣預處理技術相配合,HPLC所達到的分辨率和靈敏度,使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能,能夠分離復雜相體中的微量成分。隨著固定相的發展,有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離HPLC成為解決生化分析問題有前途的方法。由于HPLC具有分辨率、靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用,流出組分易收集等點,因而被應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域。液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發展方向。液相色譜-質譜連用技術受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農藥和多核芳烴等;液相色譜-紅外光譜連用也發展快如在環境污染分析測定水中的烴類,海水中的不揮發烴類,使環境污染分析得到的發展。
為了液相色譜儀使用的穩定性,我們對于設備使用環境是有一定要求的,包括:通風、照明、供電、環境溫度和濕度以及潔凈度,其中:
1、通風:使用液相色譜儀分析過程中,由于流動相中含有揮發性有機溶劑(甲醇、乙睛等)會產生有害氣體,對儀器中的光學元件帶來腐蝕,應注意儀器室的通風,以排除室內有害氣體、保持空氣清。通風主要有兩種方式:一種自然通風,定時打開門窗,讓內外空氣對流;另一種是制通風,如用通風柜、排風扇等,及時將有害氣體排出室外。
2、照明:室內照明要光線適中,避免陽光直射。為避開直射光線對儀器操作、觀測的影響,儀器(顯示屏)應側向光線。實驗室窗戶要掛窗簾,以便隨時調節光照度。
3、供電:液相色譜室應設有照明電源和動力電源,動力電可供儀器運行使用。為減少噪音的干擾,儀器應遠離瞬時供電的大功率電器設備,如大型電動設備、電梯、空調系統等。為HPLC泵的晶度,必須要穩定的輸人電壓,為此,建議色譜室應設有和儀器負荷相當的穩壓電源。
4、環境溫度和濕度:適宜的溫度和濕度是保障HPLC儀正常運行、性能穩定的必要條件。一般要求室溫在20一30℃之間,日溫度變化2一3℃,不要波動太大,否則,在開機分析時會影響色譜分離,夏季一定要控制室溫不要過30℃,溫度太會使流路系統產生氣泡,影響檢測器的正常工作(如熒光檢測器)。室內相對濕度應控制在60%以下。
5、潔凈度:懸浮于空氣中的顆粒物質會對色譜儀器分析帶來干擾,使本底和噪聲升,成為分析測試的污染源,直接影響純物質的純度與痕量雜質的分析。